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關注創建者:光與影 創建時間:2022-12-06

顯微成像的實例教程
用于材料科學領域的共聚焦顯微鏡,基于光學共軛共焦原理,其超高的空間分辨率和三維成像能力,提供了全新的視角和解決方案。
工作原理
共聚焦顯微鏡通過在樣品的焦點處聚焦激光束,在樣品表面進行快速點掃描并逐層獲取不同高度處清晰焦點并重建出3D真彩圖像,從而進行分析。
儀器結構
共聚焦顯微鏡主要有四部分組成:1、顯微鏡光學系統。2、掃描裝置。3、激光光源。4、檢測系統。整套儀器由計算機控制,各部件之間的操作切換都可在計算機操作平臺界面中方便靈活地進行。
一體化操作的測量分析軟件
(1)測量與分析同界面操作,無須切換,測量數據自動統計,實現了快速批量測量的功能;
(2)可視化窗口,便于用戶實時觀察掃描過程;
(3)結合自定義分析模板的自動化測量功能,可自動完成多區域的測量與分析過程;
(4)幾何分析、粗糙度分析、結構分析、頻率分析、功能分析五大功能模塊齊全;
(5)一鍵分析、多文件分析,自由組合分析項保存為分析模板,批量樣品一鍵分析,并提供數據分析與統計圖表功能;
(6)可測依據ISO/ASME/EUR/GBT等標準的多達300余種2D、3D參數。
特點與應用解析
共聚焦顯微鏡最大的特點是在成像時只獲取來自樣品的一個薄層,而剩余的光信號被消除,從而消除了深度模糊現象,獲得了超高的空間分辨率。這一特性使共聚焦顯微鏡對大坡度的產品有更好的成像效果,一般用于略粗糙度的工件表面的微觀形貌檢測,分析粗糙度、凹坑瑕疵、溝槽等參數。
展開 顯微成像技術在最近的幾十年中得到迅速發展。 PSF(點擴散函數)通常不是像平面上的艾里斑。當對沿縱軸定向的偶極子源進行成像時,可以設計出一個甜甜圈形狀。 我們在VirtualLab Fusion中證明,當偶極子源的方向發生變化時,會獲得不同的非對稱PSF(不是艾里斑)。 此外,可通過在顯微鏡系統的光瞳平面中插入一定的相位掩模來獲得雙螺旋PSF [Ginni Grover et al., Opt. Exp. 2012]。通過這種工程化的PSF,甚至可以觀察到物體的微小散焦,即與傳統的成像方法相比,可以大大提高軸向分辨率。 我們通過在VirtualLab Fusion中應用商業顯微鏡鏡頭(Nikon)系統來演示此現象。
使用高NA顯微鏡系統分析偶極子源的PSF
在VirtualLab Fusion中,可以直接分析偶極子源的PSF。 該實驗證明了當偶極子源的方向改變時,PSF具有不同的形狀。
用于3D成像顯微鏡的雙螺旋PSF
在VirtualLab Fusion中,通過在高NA顯微鏡系統的光瞳平面中插入相位掩模,以簡單快捷的方式分析雙螺旋PSF。 結果表明,即使只有一點散焦(?130 nm)的物點,雙螺旋PSF也會有旋轉。
展開 顯微成像技術在最近的幾十年中得到迅速發展。 PSF(點擴散函數)通常不是像平面上的艾里斑。當對沿縱軸定向的偶極子源進行成像時,可以設計出一個甜甜圈形狀。 我們在VirtualLab Fusion中證明,當偶極子源的方向發生變化時,會獲得不同的非對稱PSF(不是艾里斑)。 此外,可通過在顯微鏡系統的光瞳平面中插入一定的相位掩模來獲得雙螺旋PSF [Ginni Grover et al., Opt. Exp. 2012]。通過這種工程化的PSF,甚至可以觀察到物體的微小散焦,即與傳統的成像方法相比,可以大大提高軸向分辨率。 我們通過在VirtualLab Fusion中應用商業顯微鏡鏡頭(Nikon)系統來演示此現象。
使用高NA顯微鏡系統分析偶極子源的PSF
在VirtualLab Fusion中,可以直接分析偶極子源的PSF。 該實驗證明了當偶極子源的方向改變時,PSF具有不同的形狀。
用于3D成像顯微鏡的雙螺旋PSF
在VirtualLab Fusion中,通過在高NA顯微鏡系統的光瞳平面中插入相位掩模,以簡單快捷的方式分析雙螺旋PSF。 結果表明,即使只有一點散焦(?130 nm)的物點,雙螺旋PSF也會有旋轉。
展開 顯微成像技術在最近的幾十年中得到迅速發展。 PSF(點擴散函數)通常不是像平面上的艾里斑。當對沿縱軸定向的偶極子源進行成像時,可以設計出一個甜甜圈形狀。 我們在VirtualLab Fusion中證明,當偶極子源的方向發生變化時,會獲得不同的非對稱PSF(不是艾里斑)。 此外,可通過在顯微鏡系統的光瞳平面中插入一定的相位掩模來獲得雙螺旋PSF [Ginni Grover et al., Opt. Exp. 2012]。通過這種工程化的PSF,甚至可以觀察到物體的微小散焦,即與傳統的成像方法相比,可以大大提高軸向分辨率。 我們通過在VirtualLab Fusion中應用商業顯微鏡鏡頭(Nikon)系統來演示此現象。
使用高NA顯微鏡系統分析偶極子源的PSF
在VirtualLab Fusion中,可以直接分析偶極子源的PSF。 該實驗證明了當偶極子源的方向改變時,PSF具有不同的形狀。
用于3D成像顯微鏡的雙螺旋PSF
在VirtualLab Fusion中,通過在高NA顯微鏡系統的光瞳平面中插入相位掩模,以簡單快捷的方式分析雙螺旋PSF。 結果表明,即使只有一點散焦(?130 nm)的物點,雙螺旋PSF也會有旋轉。
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展開 共聚焦顯微鏡作為一種高精度的成像技術,為這些領域提供了強大的工具。
共聚焦顯微鏡成像原理
共聚焦顯微鏡的成像原理基于激光掃描和光學切片技術。通過使用光源,顯微鏡能夠對樣品進行逐點掃描,并通過共軛孔徑系統排除非焦平面的光,從而實現高分辨率的二維圖像。此外,通過逐層掃描,共聚焦顯微鏡還能夠構建樣品的三維形貌。
功能介紹
共聚焦顯微鏡在材料測量領域的主要功能包括:
1、表面粗糙度分析:測量材料表面的微觀結構和粗糙度。
2、層厚和深度測量:對多層材料系統中各層的厚度進行精確測量。
3、缺陷檢測:識別材料中的微觀缺陷,如裂紋、孔洞等。
4、三維形貌重建:構建材料表面的三維圖像,為材料特性分析提供更多維度的信息。
分辨率
共聚焦顯微鏡的分辨率是其核心優勢之一。橫向分辨率可達到亞微米級別,而軸向分辨率則更高,通常在納米級別。這種高分辨率使得共聚焦顯微鏡能夠捕捉到材料表面的微小變化和細節,清晰地展示微小物體的圖像形態細節,顯示出精細的細節圖像。它更擅長微納級粗糙輪廓的檢測。
優勢
1. 高精度測量:提供微米甚至納米級別的測量精度,滿足精密測量的需求。
2. 無損檢測:允許在不損傷樣品的情況下進行測量,適用于貴重或敏感材料。
3. 多尺度分析:能夠同時觀察材料的宏觀和微觀結構,提供全面的分析視角。
4. 實時成像:快速獲取材料表面的實時圖像,便于動態分析和過程監控。
5. 軟件支持:配備專業軟件,便于數據的采集、處理和分析,提高工作效率。
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5.3 生物醫療:內窺鏡與顯微成像的進化方向
在醫療領域,內窺鏡、手術顯微鏡、眼科診斷設備等都面臨著共同的痛點:工作距離不斷變化,操作者需要頻繁手動對焦;設備需要盡可能微型化以減少侵入性;環境光線條件不可控。這些痛點,恰好是波前編碼技術的天然用武之地。
威睛光學的無焦點技術可以將內窺鏡的清晰工作距離從傳統方案的幾毫米至幾厘米狹窄范圍,擴展到數厘米甚至十幾厘米的全焦段。
背景介紹
在顯微成像、激光加工、光存儲與單分子探測等應用中,高數值孔徑物鏡承擔著“把光壓縮到極小空間”的關鍵任務。物鏡聚焦后的焦斑尺寸、形狀、能量分布以及偏振特性,直接決定系統的分辨率、加工精度和探測靈敏度。因此,如何準確分析高數值孔徑物鏡的焦斑,已成為現代光學設計中的核心問題。本文結合VirtualLab Fusion的仿真思路,對這一典型案例進行簡要分析。
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在單分子顯微鏡成像應用中,定位精度是一個關鍵問題。由于在某一方向上的定位精度與圖像在同一方向上的點擴散函數(point spread function, PSF)的寬度成正比,因此具有較高數值孔徑(NA)的顯微鏡可以減小點擴散函數的寬度,從而提高定位精度。
高分辨顯微鏡離軸成像分析
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摘要
在單分子顯微鏡成像應用中,定位精度是一個關鍵問題。由于在某一方向上的定位精度與圖像在同一方向上的點擴散函數(point spread function, PSF)的寬度成正比,因此具有較高數值孔徑(NA)的顯微鏡可以減小點擴散函數的寬度,從而提高定位精度。